Война: Тимукуа также находились в конфликте с испанцами, которые намеревались завоевать Флориду и расширить свою территорию. Тимукуа храбро сражались против испанцев, но в конечном итоге потерпели поражение.
Культурный сдвиг: Приход испанцев также нарушил образ жизни Тимукуа. Тимукуа были вынуждены принять христианство, и им было запрещено исповедовать свою традиционную религию. Они также были вынуждены отказаться от своей земли и переехать в резервации.
Утрата личности: Тимукуа были гордым и самобытным народом, но их культура медленно разрушалась испанцами. Язык Тимукуа и многие их традиции были утрачены.
Ассимиляция: Тимукуа в конечном итоге ассимилировались с испанским населением. Сегодня чистокровных Тимукуа не осталось, но их наследие живет в географических названиях, продуктах питания и обычаях Флориды.